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微生物限度检测仪进行菌落计数并报告

发布日期:2020-04-18 18:14  浏览次数:

微生物限度(薄膜过滤法) 4.10.1取相当于每张滤膜含1g或1ml供试品的供试液,加至适量的稀释剂中,混匀,过滤。若供试品每1g或1ml所含的菌数较多时,可取适量稀释剂的供试液1ml过滤。用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或其他适宜的冲洗液冲洗滤膜,冲洗方法和冲洗量同“计数方法的验证”。冲洗后取出滤膜,菌面朝上贴于营养琼脂培养基或玫瑰红钠琼脂培养基或酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。 4.10.2阴性对照试验 取试验用的稀释液1ml,照上述薄膜过滤法操作,作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。 4.10.3培养和计数 除另有规定外,细菌培养48小时,微生物限度检测仪逐日点计菌落数,一般以48小时的菌落数报告;霉菌、酵母菌培养72小时,逐日点计菌落数,一般以72小时的菌落数报告;必要时,可适当延长培养时间至5~7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后,计算各稀释级供试液的平均菌落数,按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不少于15,则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。 4.10.4菌数报告原则 以相当于1g或1ml供试品的菌落数报告菌数;若滤膜上无菌落生长,以<1报告菌数(每张滤膜过滤1g或1ml供试品),或<1乘以稀释倍数的值报告菌数。 方法/步骤 1、准备好取水点所用三角瓶,经高温(250℃,0.5h)灭菌。 镊子经铝箔纸包装后,经高温(250℃,0.5h)灭菌。 配制需求量的R2A培养基和缓冲液(可以选用0.9%氯化钠溶液或pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液),经高压蒸汽灭菌(121℃,15min)。 包装好过滤装置,经高压蒸汽灭菌(121℃,15min)。如果不放心可以选用高压蒸汽灭菌(121℃,30min)。注:这样更安全一些,避免阴性对照长菌。 进行试验,首先将R2A培养基倾倒在一次性培养皿上,待凝固,备用。 取1ml各取水点的水加入至事先称好的灭菌缓冲液(体积大小可以自己选用,因为是薄膜过滤法,溶液全部经过滤膜,所以选用一个操作方便的体积即可)中,过滤。然后用100ml缓冲液冲洗滤膜3次。 7 取出滤膜,平放在培养基上,轻轻将气泡赶出。 注:一般一个取水点至少做2个皿。阴性对照可直接加入同体积的缓冲液,其余同步骤6

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